常见Elisa试剂盒DIY夹心法技术指南

1、选择抗体时最好选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；最好从同一家公司选择抗体对。

2、Elisa试剂盒实验中为了确定最佳信号和最低背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。

3、标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。

4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。

5、为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。

6、若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。

7、当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig。

 

华美生物工程有限公司具有完善的ELISA试剂盒开发平台，成熟的抗原、抗体研发系统，熟练掌握各种酶联技术，如双抗夹心法、（直接）竞争法、间接竞争法、阻断法、间接法、双抗原夹心法等方法，结合我公司的诊断试剂开发团队我们可以有效的将试剂盒开发为临床诊断级别，质量处于世界前列