【Z】组培应用之诱变育种

    选育丰产、优质的植物新品种，对丰富人们日益增长的物质生活具有重要的意义。由于主要靠无性繁殖的植物，如大蒜、姜其品种差异多源于自然变异，差异小，而 且产生变异需要的时间长。不能进行常规的有性杂交，就难以充分利用丰富的遗产多样性，因而限制了品种改良。早在20世纪50年代，CRANHALL和 ZWINTZSCHER等育种学家就开始探索突变育种技术，在40多年的发展过程中，从诱变剂的利用到诱变手段及分离筛选技术这一套诱变体系日趋完善。

    近年来，我国组织培养技术迅速发展和普及，组织培养技术和诱变技术相结合，能有效地避免嵌合体的形成，具有不受环境条件限制、高效低耗，扩大变异谱和提高 变异率等优点。可以用来对原生质、悬浮培养物、愈伤组织体系和花药培养体系以及产生的植株进行福照诱变，进而作体外筛选。组织培养技术和诱变技术相结合。 在加速育种进程，提高育种效率，改进育种技术方面具有很大潜力，育成新品种的种类和数量也不断增加。

植物组织培养与诱变相结合技术

1、用诱变剂处理单细胞、愈伤组织或原生质体

用诱变剂处理单细胞和原生质体可以避免或限制嵌合体的形成。在甜橙原生质体培养基中加入EMS，接种培养2周后用X射线照射，经8-10周培养，可 成功地诱导甜橙原生质体产生胚状体并再生植株。用EMS处理和X射线照射处理猕猴桃和苹果原生质体也获得再生植株。用诱变剂处理后的外植体或愈伤组织上单 细胞（或少数细胞）分化成植株变异率增加。

2、用诱变剂处理花药

用诱变剂处理花药，经离体培养诱发突变，获得突变体，通过染色体加倍，得到稳定而纯合的突变系。辐射后的花粉培养集中了单倍体育种和辐射育种的优 点，提高了诱变频率，克服了嵌合现象，后代分离小、易稳定。

3、用诱变剂处理离体培养茎尖

采用不同辐射剂量、剂量率处理植物茎尖分生组织，离体培养芽、嫩枝、不定芽等，可获得有益变异，如株高，果皮色，产量等性状的变异。用Y射线照射柑 橘茎尖组织诱变，可收到扩大突变范围的效果，人工诱变率提高到4.49%（自然突变频率0.75%-1.3%）。

4、用诱变剂处理愈伤组织

用Y射线（30GY）照射水稻花药愈伤组织可促进分化。剂量超过40GY会抑制分化。将大蒜初萌发幼叶片切成3CM长条接种到MS+2.4- D2MG/L+水解酪蛋白500MG/L+酵母提取物100MG/L的培养基上，置温度25度，光照3000LX，16H/D条件下培养70D，生成类似 球状结构的愈伤组织，然后用Y射线（1-10GY）照射这些球状体愈伤组织，在经60D培养获得大量有诱发突变的愈伤组织球状体。将愈伤组织球状体分离、 继代培养，同时进行病原接种或逆镜压力筛选，最终获得有益的突变系。

5、植物组织培养结合诱变技术的关键问题

（1）选定合理的辐照受体和部位

（2）筛选出适宜的剂量和剂量率

（3）采用正确的体外选择方法